K-卡拉胶五糖减弱Aβ25-35所诱导的SH-SY5Y细胞的凋亡及可能机制

摘要

目的：
　　β淀粉样斑块（β-amyloid，Aβ）所诱导的神经元凋亡是阿尔茨海默病（Alzheimer's disease，AD）重要的病理特征，关于拮抗Aβ所诱导的细胞凋亡的抑制剂也许会成为AD潜在的新的药物治疗靶点。K-卡拉胶五糖（K-carrageenan-derived pentasaccharides，KCPs）是从海洋红藻中提取的一种具有多种生物活性的卡拉胶单糖，可能会对AD有一定的治疗效果。此研究旨在探讨KCPs是否具有拮抗Aβ25-35所诱导的神经瘤母细胞（SHSY-5Y）损失的神经保护作用并初步探讨潜在的机制。
　　方法：
　　不同浓度的Aβ25-35诱导SHSY-5Y细胞24小时，筛选出最佳的造模浓度。实验分为正常对照组，Aβ25-35实验组以及药物干预组，3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐（3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide，MTT）测细胞生存率，膜连蛋白-V-异硫氰酸荧光素/磷脂酰丝氨酸(Annexin-V-FITC/PI)双染法测细胞凋亡，免疫荧光测Cleaved caspase3蛋白，免疫印迹（Western blotting，WB）测Cleaved caspase3、JNK（c-Jun N-terminal kinase）、p-JNK蛋白的表达。
　　结果：
　　结果提示SHSY5Y细胞经过KCPs的预处理后能显著减弱Aβ25-35所诱导的细胞凋亡并且呈一定的剂量-依赖关系。另外，KCPs能够减少cleavage caspase-3蛋白的表达并且可以抑制JNK信号通路的过度激活。
　　总结：
　　实验结果说明KCPs能够减弱Aβ25-35所诱导的神经毒性并且可以通过抑制JNK信号通路的过度激活来减少细胞的凋亡。上述结果说明了KCPs对于神经退行性疾病可能会成为有效的潜在药物靶点。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

2结果

2.1 SH-SY5Y细胞最佳造模浓度的筛选

2.2 SH-SY5Y细胞经k-卡拉胶五糖及Aβ25–35共孵育后的细胞存活率

2.3 KCP拮抗Aβ25–35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡作用

2.4 凋亡蛋白cleaved caspase 3的表达情况

2.5 JNK信号通路在KCP干预Aβ25–35诱导的SH-SY5Y细胞中的变化情况

3讨论

全文总结

参考文献

文献综述:糖代谢与阿尔茨海默病之间关系的研究

致谢

攻读学位期间已发表的文章