声明
符号说明
前言
第一部分吴茱萸碱对肝癌细胞SMMC-7721及HepG2增殖及凋亡的影响
1.材料和方法
1.1 细胞株
1.2 试剂及仪器
1.3 主要试剂的配制
1.4 细胞增殖实验
1.5 Hoechst染色检测细胞形态学变化
1.6 克隆形成检测细胞增殖
1.7Western blot检测Bax,Bcl-2和P53蛋白的表达
1.8统计学分析
2.结果
2.1吴茱萸碱对肝癌细胞增殖的影响
2.2 Hoechst染色检测吴茱萸碱对肝癌细胞凋亡的影响
2.3克隆形成实验分析吴茱萸碱对细胞增殖的影响
2.4吴茱萸碱对肝癌细胞中Bax, Bcl-2和P53蛋白表达的影响
3.讨论
第二部分吴茱萸碱在体内对肝癌的影响
1.1实验动物
1.2 实验试剂和仪器
1.3 构建动物模型
1.4 动物瘤体观察
1.5 HE染色检测动物组织中肿瘤细胞的形态学变化
1.6 TUNEL染色检测裸鼠组织中肿瘤细胞的凋亡情况
1.7 统计学分析
2 结果
2.1 吴茱萸碱对动物瘤体生长的影响
2.2 吴茱萸碱对裸鼠瘤体重量的影响
2.3 吴茱萸碱对裸鼠瘤体中肿瘤细胞形态的影响
2.4 吴茱萸碱对裸鼠瘤体中肿瘤细胞凋亡的影响
3讨论
第三部分吴茱萸碱在体内外通过NOD1通路调控肝癌细胞增殖及凋亡的机制研究
1材料及方法
1.1 细胞株
1.2 裸鼠瘤体组织
1.3 实验试剂和仪器
1.4 PCR及Western Blot检测NOD1在正常肝细胞及肝癌细胞中的表达情况
1.5 Western Blot检测体内外吴茱萸碱对肝癌细胞中NOD1通路相关蛋白表达情况
1.6 免疫荧光检测在体内外吴茱萸碱对肝癌细胞中NOD1及p-P65的表达及分布的影响
1.7 EdU检测经IE-DAP预处理后,吴茱萸碱对肝癌细胞增殖的影响
1.9 Western Blot 检测经IE-DAP预处理后,吴茱萸碱对肝癌细胞凋亡、周期及NOD1通路相关蛋白表达的影响
1.10 统计学分析
2 结果
2.1 正常肝细胞及肝癌细胞中NOD1的表达情况
2.2 吴茱萸碱对肝癌细胞中NOD1通路相关蛋白表达的影响
2.3 吴茱萸碱对肝癌细胞中NOD1及p-P65蛋白水平的影响
2.4 吴茱萸碱对瘤体组织中NOD1通路相关蛋白水平的影响
2.5 吴茱萸碱对瘤体组织中NOD1及p-P65水平的影响
2.6经IE-DAP预处理后,吴茱萸碱对肝癌细胞增殖的影响
2.7经IE-DAP预处理后,吴茱萸碱对肝癌细胞周期的影响
2.8 经IE-DAP预处理后,吴茱萸碱对肝癌细胞中凋亡及周期相关蛋白的影响
2.9 经IE-DAP预处理后,吴茱萸碱对肝癌细胞中NOD1通路相关蛋白的影响
3讨论
全文总结
参考文献
文献综述:吴茱萸碱抑制肿瘤增殖活性的研究进展
致谢
攻读硕士学位期间发表的论文