阿法替尼调控Egr-1/TLR4/mTOR信号通路抑制肝癌细胞Hep3B增殖迁移侵袭及促进细胞凋亡的机制

摘要

目的:探讨阿法替尼是否通过早期生长反应因子1(Egr1)/Toll样受体4(TLR4)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路,抑制肝癌细胞Hep3 B增殖迁移侵袭并促进其细胞凋亡.方法:采用不同浓度的阿法替尼处理Hep3 B细胞,用免疫印迹试验(Western Blot)检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、活化的(Cleaved)-天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP9、Egr-1、TLR4、mTOR蛋白的表达,用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞凋亡,Transwell测定细胞迁移侵袭.在Hep3B细胞中转染pcDNA-Egr-1,并使用2.0μmol/L阿法替尼处理,采用上述方法检测细胞的增殖、迁移侵袭和凋亡.结果:阿法替尼显著降低Hep3B细胞的CyclinD1、MMP2、MMP9、Egr-1、TLR4、mTOR蛋白含量、增殖活性、细胞迁移及侵袭数量,显著提高Cleaved-caspase-3蛋白含量和凋亡率(P<0.05).pcDNA-Egr-1可以逆转阿法替尼对Hep3B细胞增殖、迁移侵袭、凋亡和Egr-1/TLR4/mTOR信号通路的影响.结论:阿法替尼可以抑制肝癌细胞Hep3B的增殖,迁移侵袭,并诱导其凋亡,其机制与下调Egr-1/TLR4/mTOR信号通路有关.