浙江近海曼式无针乌贼生物学特性变化及ALSM基因初步研究

摘要

曼氏无针乌贼(Sepiella maindroni)曾是我国的“四大海产”之一，其资源量在浙江近海海域经历了由丰富到枯竭的过程。近几年随着曼氏无针乌贼增殖放流及产卵场保护和修复工作的开展，曼氏无针乌贼资源在自然海域又出现了明显的恢复迹象。在养殖条件下曼氏无针乌贼由一年生变为一年两茬，其生物学特性发生了较大变化，而在被放流到自然海域后又恢复为一年生状态。在此背景下，有必要对浙江近海曼氏无针乌贼生物学特性的变化情况进行研究。本研究对曼氏无针乌贼的繁殖生物学、食性及生长等生物学特性的变化情况进行了探索，并对涉及调控生长发育的ALSM基因进行了初步研究，以便将来从分子角度探索曼氏无针乌贼生物学特性的变化。结果表明： 1.曼氏无针乌贼卵巢在9月份已经可以明显观察到，并且卵巢成熟系数于次年4月份达到顶峰。较上世纪六十年代初、八十年代初，曼氏无针乌贼性腺发育提前，且繁殖期延长。卵巢质量成为影响自然海域曼氏无针乌贼生殖力的最重要指标，个体怀卵量、绝对生殖力和体长相对生殖力均随着卵巢质量的增大而提高。 2.曼氏无针乌贼的食物种类较上世纪八十年代初种类有所减少。胃饱满度系数在3月份达到最低值，仅为103‰，而在11、12月份均维持在220‰以上；曼氏无针乌贼各月份的胃饱满度系数均低于上世纪八十年代初同期乌贼胃饱满度系数。 3.曼氏无针乌贼雌雄个体均处于非正常生长状态。曼氏无针乌贼各生命阶段的体长、体重等生物学指标较上世纪八十年代初同期乌贼数据呈下降趋势。与养殖曼氏无针乌贼相比，同发育阶段野生乌贼个体肥满度相对较低。 4.本研究首次克隆得到曼氏无针乌贼ALSM基因。其中ALSM cDNA序列全长1418bp，其包括53bp的5′端非翻译区，1290bp阅读框以及含有poly(A)信号AATAAA的75bp3′端非翻译区，阅读框编码429个氨基酸残基。推测曼氏无针乌贼ALSM基因编码的蛋白为一种亲水性分泌蛋白。

目录

摘要

ABSTRACT

第一章 前言

1.1 曼氏无针乌贼相关研究进展

1.1.1 曼氏无针乌贼资源变动研究

1.1.2 曼氏无针乌贼生物学特性研究

1.1.3 曼氏无针乌贼繁殖生物学研究

1.1.4 曼氏无针乌贼食性研究

1.1.5 曼氏无针乌贼年龄与生长研究

1.1.6 曼氏无针乌贼分子生物学研究

1.2 ALSM 基因的研究

1.3 本研究的内容、目的、意义及展望

1.3.1 内容、目的和意义

1.3.2 展望

第二章 曼氏无针乌贼繁殖生物学特性变化研究

2.1 材料和方法

2.1.1 材料

2.1.2 实验器材

2.1.3 方法

2.2 结果与分析

2.2.1 生物学体型及卵体积变化研究

2.2.2 卵巢成熟系数(GSI)变化研究

2.2.3 怀卵量和生殖力变化研究

2.2.4 生殖力与各生物学指标的单一关系变化研究

2.2.5 生殖力与各生物学指标的多维关系变化研究

2.3 讨论

第三章 曼氏无针乌贼食性变化研究

3.1 材料和方法

3.1.1 材料

3.1.2 实验器材

3.1.3 方法

3.2 结果与分析

3.2.1 饵料生物的组成变化研究

3.2.2 胃饱满系数变化研究

3.2.3 曼氏无针乌贼食物选择性研究

3.3 讨论

第四章 曼氏无针乌贼生长变化研究

第一节 曼氏无针乌贼雌雄个体生长研究

4.1.1 材料和方法

4.1.2 结果与分析

4.1.3 讨论

第二节 曼氏无针乌贼生物学性状研究

4.2.1 材料和方法

4.2.2 结果与分析

4.2.3 讨论

第五章 曼氏无针乌贼 ALSM 基因克隆及序列分析

5.1 材料与方法

5.1.1 材料

5.1.2 实验试剂和器材

5.1.3 方法

5.2 结果与分析

5.2.1 曼氏无针乌贼肝脏总 RNA 的提取

5.2.2 曼氏无针乌贼 ALSM 基因 cDNA 部分序列克隆与分析

5.2.3 曼氏无针乌贼 ALSM 基因 5′、3′端 cDNA 序列克隆与分析

5.2.4 曼氏无针乌贼 ALSM 生物信息学分析

5.2.5 曼氏无针乌贼 ALSM 同源性分析与系统进化树构建

5.2.6 曼氏无针乌贼 ALSM 氨基酸序列分析与蛋白质结构预测

5.3 讨论

结论

参考文献

致谢

在读期间发表的学术论文及研究成果