遗传性对称性色素异常症家系ADAR1基因突变研究

摘要

研究背景：
　　遗传性对称性色素异常症（Dyschromatosis Symmetrica Hereditaria，DSH，OMIM127400）又称Dohi对称性肢端色素沉着症（Retieulate Aeropigmentation of Dohi，RAD），是一种常染色体遗传性皮肤病，临床上少见，患者多在婴儿期或儿童早期发病，据统计约70％患者在6岁前发病，主要临床表现为分布于肢端的对称性色素沉着及色素减退斑，随年龄增长皮损逐渐增多，颜色加深，严重者可波及全身，一般到青春期前稳定，可持续终身。患者一般无自觉症状，皮损多夏季明显，日晒加重，该病的男女发病率为1∶1，病情轻重无性别差异。
　　近年来，越来越多的学者对DSH的病因进行了深入的研究。2003年Zhang等对中国DSH家系进行全基因组扫描，将该病的致病基因定位于1号染色体1q11~1q21的区间内。Miyamura等对4个DSH家系进行检测，将致病基因范围缩小至1q21.3上约500kb的区域，排除单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphism，SNP）的可能，最终将 DSH的致病基因确定为1号染色体1q11~1q21区间内的双链RNA特异性腺苷脱氨酶基因（Adenosine Deaminase，RNA-specific-1，ADAR1）。
　　到目前为止，国内外报道可能造成DSH的ADAR1基因突变超过一百种，突变形式多样，对DSH家系进行ADAR1基因突变检测，探讨其发病的分子遗传学机制，有利于为患者提供遗传咨询及早期诊断，并为将来的基因治疗奠定基础。
　　研究目的：
　　明确1个中国湖南籍遗传性对称性色素异常症家系的ADAR1基因突变位点及突变方式，以探讨该突变与DSH表型的关系，为DSH积累遗传学数据。
　　研究对象和方法：
　　收集1个遗传性对称性色素异常症2代家系成员的临床资料并进行分析，采集家系中7名成员及50名无血缘关系正常人的外周血样本，提取 DNA，以ADAR1基因作为目标基因，采用PCR扩增ADAR1基因全部外显子，对扩增产物进行测序；分析DSH家系成员ADAR1基因突变情况与其临床表型的关系。
　　研究结果：
　　对ADAR1基因进行全外显子测序检测后，发现该家系成员中ADAR1基因2号外显子存在1096~1097位碱基AA缺失（c.1096_1097delAA），造成移码突变p.K366fsX。先证者的母亲为纯合缺失，而先证者及其妹妹、舅舅及其儿子均表现为杂合缺失。先证者的父亲、舅母及对照组成员ADAR1基因检测未发现突变。
　　结论：
　　发现国内首个汉族DSH家系ADAR1基因2号外显子存在c.1096_1097delAA（p.K366fsX）移码突变。这一突变结果丰富了ADAR1基因突变数据库，为今后有关DSH的遗传学研究提供了新的线索。

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中文摘要

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前 言

研究对象和方法

1 研究对象和临床资料

2 主要实验设备

3 实验试剂

4 试验方法

5 引物设计

6 PCR反应

7 琼脂糖凝胶电泳

8 PCR产物进行凝胶回收

9 注意事项

10 PCR结果判断

流程图

结 果

1 患者家系的临床特征

2 患者及其家系成员基因扩增产物

3 PCR产物测序结果

讨 论

结 论

本研究创新之处

存在问题和展望

参考文献

综 述

攻读硕士学位期间完成和发表的论文

致谢

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