乌司他丁预防裸鼠结肠癌肝转移模型部分肝切除术后复发的研究

摘要

目的：乌司他丁的药用机理可以分为抑制酶的活性和抗炎的效应，作为尿激酶抑制剂（UI）的类似物，能有效抑制各种酶的活性，关于这一独特的药理学性质，目前仍未引起足够的重视。结肠癌肝转移部分肝切除术后仍有较高的复发率。手术诱导肝细胞再生是刺激肝内微小转移灶进展的机制之一，基质金属蛋白酶-9（MMP-9）是参与晚期阶段肝脏实质性细胞再生的一重要因子，也是细胞外基质降解的主要成分。MMP-9的激活可以被乌司他丁的抗纤溶酶活性而抑制。本研究拟通过动物实验，评估乌司他丁在预防结肠癌肝转移切除术后复发的临床应用，拓展其在预防肿瘤复发方面的临床应用，并探讨其机制，为指导乌司他丁的临床应用提供可靠的药理学依据及最佳用药时机，为干预结肠癌肝转移术后复发提供有效的治疗手段及合理治疗方案。
　　方法：取人类结肠癌HCT116细胞常规培养、传代并最终调整浓度为2*107/ml的单细胞悬液；1％戊巴比妥钠腹腔内注射麻醉，并固定裸鼠；开腹经脾脏包膜下注入6周龄的BALB/C-nu品系雄性裸鼠，关腹；14天后取仰卧位再次开腹行肝左叶切除，关腹；结肠癌肝转移模型建立后随机分成3组，每组12只：乌司他丁早期治疗组：肝左叶切除术后立即予乌司他丁治疗，连续用药一周。乌司他丁晚期治疗组：肝左叶切除术后一周开始予乌司他丁治疗，连续用药一周。阴性对照组：安慰剂（0.9%生理盐水）治疗组。部分肝（肝左叶）切除术后21天处死裸鼠，取肝组织行HE染色鉴定有无肝癌，免疫组化检测MMP-9在肝肿瘤组织中的含量。
　　结果：
　　1.全部36例实验动物，处死后肉眼均可见肝内有黄白色结节，结节型肝癌有11例（30.56%），弥漫性肝癌有15例（41.66%），混合型肝癌10例（27.78%）（如图1所示）；
　　2.全部36例实验动物肝肿瘤组织标本经HE染色后鉴定均为继发性肝癌（如图2所示）。
　　3.乌司他丁早期治疗组（1.898±0.342）肿瘤内的MMP-9水平显著低于阴性对照组（2.775±0.094）（如表3所示：F=73.318，p=0<0.01）
　　4.阴性对照组（2.775±0.094）肿瘤内的MMP-9水平显著高于晚期治疗组（1.079±0.345）（如表4所示：F=269.547，p=0<0.01）
　　5.乌司他丁早期治疗组（1.898±0.342）肿瘤内的MMP-9水平显著高于晚期治疗组（1.079±0.345）（如表5所示：F=34.12，p=0<0.01）
　　6.阴性对照组中，未经乌司他丁处理的肝癌组织中MMP-9（2.775±0.094）高表达，显著高于癌旁组织（1.499±0.222）（如表6所示F=336.780；p=0<0.01）；
　　结论：综上所述，乌司他丁可能通过抑制MMP-9生成从而抑制肿瘤浸润、转移；临床上对待转移瘤，术前应评估肿瘤所占肝组织的比率，避免行30%的肝切除；乌司他丁用药时机在肝切除术后一周为佳。

目录

封面

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英文缩写及中英文对照

中文摘要

英文摘要

前 言

材料和方法

一 材料

二 实验方法

结 果

讨 论

1. 乌司他丁（UTI）

2.基质金属蛋白酶（Metalloproteases,MMPS）

3.基质金属蛋白酶-9（Metalloprotease-9，MMP-9）

4.结肠癌肝转移部分肝切除

5．部分肝切除术后肝再生与肝残余肿瘤生长、MMP-9的关系

6 乌司他丁应用的合理时机

结论

参考文献

附图

综述

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致谢

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