SLE患者外周血γδT细胞及细胞因子水平与疾病活动性的相关研究

摘要

[目的]系统性红斑狼疮(systemiclupuserythematosus,SLE)是一种多器官损害的自身免疫疾病。SLE的发生发展与遗传因素、环境诱发因素以及机体免疫系统紊乱有关，其中机体免疫功能紊乱在SLE的发生发展过程中起着至关重要的作用。本课题拟从细胞和分子水平的角度，以γδT细胞及IFN-γ和趋化因子IP-10为靶点，观察他们免疫状态，探讨它们与SLE疾病活动性和肾脏损害的关系，从而探讨SLE的发病机制。 [方法]32例SLE患者，根据活动指数评分，将病人分为活动期和稳定期两组。同时，按尿常规、肾功能、24小时尿蛋白定量将SLE患者分为狼疮肾炎(LN组)组和非肾炎组。另设健康志愿者为对照组。采用三色流式细胞术来检测32例SLE患者外周血中用不同刺激剂做细胞培养后的γδT细胞及IFN-γ+的情况；ELISA法检测培养后血浆IFN-γ及趋化因子IP-10的水平。 [结果]1.流式细胞仪检测细胞培养后培养细胞中CD45+IFN-γ+和CD45-γδT+细胞的百分率情况：分别应用不同的刺激剂：PMA、PHA、IM、抗blys单抗多种刺激剂刺激SLE外周血，用三色法流式细胞术检测γδT细胞及IFN-γ的百分率。 1.1γδT细胞百分率的情况γδT细胞百分率在加入刺激剂后明显下降；因此以未刺激组的γδT细胞百分率为准。SLE活动组与稳定组水平下降及对照组之间差异有统计学意义(P＜0.01)。 γδT细胞在SLE活动组的LN(lupusnephritis,LN)组百分率较非LN组降低(P＜0.01)。 1.2IFN-γ+表达百分率情况IFN-γ+表达百分率在不同分组中表达：SLE活动组＞SLE稳定组＞对照组。在合并肾脏损害患者中，总淋巴细胞表达IFN-γ的阳性百分率：LN组＞非LN组。IFN-γ水平与SLEDAI评分呈正相关(P＜0.01)。 2应用ELISA方法检测细胞培养后血浆中检测IFN-γ及IP-10水平情况 提取细胞培养后的血浆，应用ELISA法检测IFN-γ及IP-10水平。IP-10水平与IFN-γ水平均显示：SLE活动组＞SLE稳定组＞对照组；LN组水平高于非LN组水平。血浆IFN-γ及IP-10水平与SLEDAI评分呈正相关。 [结论]应用不同的刺激剂刺激后γδT细胞百分率下降，有可能与刺激剂引起γδT细胞表面抗原丢失有关；应用不同的刺激剂对刺激IFN-γ分泌作用不一致；用PMA+IM在SLE患者外周血IFN-γ体外刺激的效果较满意；SLE患者体内γδT细胞下降，γδT细胞水平在SLE活动组和稳定组均下降，在LN(lupusnephritis,LN)组百分率较非LN组降低；提示γδT细胞下降与SLE病情发生发展相关；IFN-γ及IP-10水平增高与SLE疾病活动性呈正相关，建议可作为判断SLE疾病活动临床参考指标之一；抗blys单抗下调IFN-γ及IP-10的表达可作为检测该单抗干扰SLE免疫功能的靶点之一。

目录

学位论文知识产权声明

1前言

第一部分SLE患者外周血γδT细胞及IFN-γ水平与疾病活动性的相关研究

第二部分SLE患者血浆γ干扰素及γ干扰素诱导的蛋白-10变化与临床意义

参考文献

文献综述γδT细胞及其在系统性红斑狼疮发病机制中的研究进展

致谢

附录