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纳米二氧化钛对内质网应激诱导肝癌细胞凋亡中的作用及其相关机制的探讨

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摘要

1 前言

1.1 研究背景

1.2 研究目的

1.3 研究内容

2 材料与方法

2.1 实验材料

2.2 实验方法

3 结果

4 讨论

5 小结

参考文献

综述 纳米二氧化钛的研究进展

致谢

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摘要

[目的]
  1.明确纳米二氧化钛能够抑制肝细胞增殖,尤其是肝癌细胞的作用。
  2.明确纳米二氧化钛能够诱导肝细胞,尤其是肝癌细胞产生调亡的作用。
  3.阐明内质网应激信号通路在纳米二氧化钛诱导肝癌细胞凋亡的作用机制,为肝癌的治疗提供新的思路,并为纳米二氧化钛的生物安全性研究提供新的实验研究依据。
  [方法]
  1.经过纳米二氧化钛处理的6孔板中,分别加入固定数量的L02细胞和HepG2细胞,培养48h后收集细胞,使用细胞计数的方法,通过计数培养后细胞的数量,来确定纳米二氧化钛对正常肝细胞及肝癌细胞生长的影响。
  2.经过纳米二氧化钛处理的6孔板中,分别加入固定数量的L02细胞和HepG2细胞,培养48 h后收集细胞,应用AnnexinⅤ/7-AAD双染色法流式细胞术检测L02细胞和HepG2细胞凋亡情况。
  3.经过纳米二氧化钛处理的6孔板中,分别加入固定数量的L02细胞和HepG2细胞,培养48 h后收集细胞,提取细胞中的蛋白,使用Western Blot,通过分析培养后细胞中ATF6和PERK蛋白的表达量,来确定纳米二氧化钛通过内质网应激来诱导肝癌细胞凋亡。
  [结果]
  1.细胞计数:纳米二氧化钛对L02细胞的生长状态无明显影响,但是对HepG2细胞的生长却明显抑制,并且呈一定的浓度依耐性,差异具有统计学意义(P<0.05)。
  2.流式细胞术分析:L02细胞未出现明显的凋亡,而随着纳米二氧化钛浓度的增加HepG2细胞的凋亡率也明显增加,与对照组比较筹异具有显著统计学意义(P<0.05)。
  3.Western Blot分析;在L02细胞中,ATF6和PERK的表达量与对照组比较,没有明显变化,在HepG2细胞中,ATF6和PERK的表达明显上调,均具有浓度依赖性。
  [结论]
  1.纳米二氧化钛可以抑制肝癌细胞的生长。
  2.纳米二氧化钛可以诱导肝癌细胞的凋亡。
  3.纳米二氧化钛通过内质网应激诱导肝癌细胞凋亡。

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