酵母基因芯片的制备及其在热休克基因表达谱研究中的应用

摘要

该研究利用RD-PCR(RestrictionDisplay-PCR,RD-PCR)技术,从酵母细胞中分离出大量cDNA片段,克隆和构建了cDNA片段文库,进一步将单基因片段纯化出来,建立了相应的数据库对所有信息进行管理.经纯化的cDNA片段作为基因芯片的探针.采用Cartesian基因芯片打印仪,将纯化的cDNA片段打印在CORNING玻片表面,制作了酵母细胞基因表达谱芯片.最后提取热休克前后酵母细胞的总RNA,经逆转录标记合成cDNA后与酵母基因表达谱芯片杂交,初步研究了酵母细胞在热应激时基因表达的变化.综上所述,该研究采用RD-PCR技术,探索了利用该技术快速分离大量cDNA片段的具体过程,并建立了酵母cDNA文库及酵母cDNA探针文库,为DNA芯片的制备打好基础.

目录

英文缩写词表

引言

第一部分应用RD-PCR技术初步建立酵母的cDNA文库以及探针数据库

材料与方法

实验结果

讨论

第二部分初步应用酵母基因表达谱芯片研究热休克后的差异基因表达

材料与方法

实验结果

讨论

结论

参考文献

综述

致谢