新西兰大白兔骨髓基质细胞的诱导分化及其生物活性物质分析的实验研究

摘要

第一部分:骨髓源基质细胞体外诱导分化成神经元样细胞的实验研究 目的:研究兔骨髓基质细胞体外培养及诱导分化为神经元样细胞的可行性.材料及方法:1.以新西兰大白兔为实验对象,无菌条件下抽取兔骨髓,梯度密度离心获取骨髓基质细胞.2.在体外应用神经干细胞培养基和细胞因子进行BMSCs向神经干细胞、神经元样细胞的诱导分化.细胞培养中分别加入RA、GDNF、BDNF等细胞生长因子.3.CK2型倒置相差光学显微镜(OLYMPAS,JAPAN)追踪观察细胞生长情况并拍照;采用SABC法进行免疫细胞化学鉴定.结论:兔BMSCs是具有较强的自我更新能力和多向分化潜能的细胞,在一定条件下,可分化为神经干细胞并进一步分化为神经元样细胞,表达神经系细胞抗原.RA和GDNF在BMSCs向神经元样细胞分化的过程中起着积极作用.特异性BMSCs可作为神经细胞的种子细胞.第二部分:兔骨髓源性神经元样细胞生物活性物质检测的实验研究 目的:1.揭示源于骨髓的体外培养神经干细胞诱导分化为神经元样细胞后是否具有与正常神经元相同的生物化学特性或有何差别,能否合成和分泌神经递质类生物活性物质成分.2.作为神经干细胞体外鉴定的方法之一,为神经干细胞治疗神经系统疾病提供功能学理论依据.方法:1.对BMSCs、L-02肝细胞、RPMI1640培养基、神经干细胞培养基、NSCb(7d和14d)、神经元样细胞培养20d分别行HPLC L-ECD-6A电化学检测并比较、分析单胺类生物活性物质.2.对BMSCs、实验组[基础培养(NSCb),加入诱导因子RA+GDNF(NSCa)、BDNF]培养诱导10d所获

目录

中英缩略词对照表

研究背景

第一部分兔骨髓基质细胞体外诱导分化成神经元样细胞的实验研究

前言

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

第二部分兔骨髓源性神经元样细胞神经递质类生物活性物质检测的实验研究

前言

材料与方法

讨论

小结

参考文献

论文图片及说明

全文结论

综述神经干细胞分化与鉴定的研究进展

学习期间发表的论文与综述

致谢