小鼠卵丘细胞自体与异体核移植的探索

摘要

本研究共分3个部分。首先是建立常规的小鼠体细胞核移植方法，具体以B6D2F1小鼠卵丘细胞作为核供体，用piezo操作系统把PVP处理的供体细胞核直接注入去核的同品系小鼠MII卵母细胞质中获得重构胚胎，用SrCl2激活后，再用CZB溶液培养至囊胚阶段。在此基础上，设计了下面的两组实验： a、把同一只小鼠的卵丘细胞核注射到同一只小鼠的去核卵母细胞内(简称自体克隆). b、把一只小鼠的卵丘细胞注入另一只小鼠的去核卵母细胞内(简称异体克隆)，然后比较两种重组胚的体外发育能力。结果发现，自体克隆与异体克隆胚胎形成原核的比例(83.2％，89.9％vs95.8％)和卵裂比例(98.4％，93.6％vs98.5％)与孤雌激活对照间没有差异(p＞0.05)。继续培养发现，自体和异体克隆胚胎发育至4-细胞(82.9％，80.8％vs95.7％)、桑椹胚(75.2％，70.4％vs92.8％)、和囊胚(31.8％，25.6％vs72.5％)阶段的比例显著低于对照组(p＜0.05)；两种处理间未见任何差异(p＞0.05)。最后，进行了克隆胚胎的输卵管和子宫移植，其中自体克隆组移植了77枚原核胚和37枚囊胚，，异体克隆组移植了68枚原核胚和28枚囊胚，均无克隆小鼠出生。初步结果表明，核/质基因型的相同与否不影响克隆胚胎的体外发育能力，对克隆胚胎继续发育的影响还需深入的研究。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略语表

独创性声明及关于论文使用授权的说明

第一章文献综述小鼠体细胞核移植的方法及应用

1小鼠克隆的方法与步骤

2克隆小鼠在基础研究中的应用

3结语

第二章研究论文小鼠卵丘细胞自体和异体核移植的探索

1材料和方法

2实验设计

3实验结果

4讨论

参考文献

致谢