红龙果红色素稳定性及生物活性研究

摘要

本文以红龙果果肉为实验材料，优化了红龙果红色素的提取纯化工艺，建立了红龙果红色素的HPLC-MS分析方法，讨论了影响红色素稳定性的各种因素，并探讨了红色素的生物活性，为红龙果的加工和红龙果红色素的开发利用提供技术支撑。主要实验结果如下：
　　 静态、动态吸附和解吸实验表明，大孔吸附树脂S-8对红龙果红色素具有良好的吸附和解吸性能。大孔吸附树脂分离纯化红龙果红色素的最佳工艺条件为：上样液pH3.0，上样液浓度1.0 mg/mL，吸附速率3.0 BV/h，0.1％HCl-40％乙醇溶液为洗脱剂，洗脱速率1.5 BV/h。以此条件经过柱层析纯化所得的色素产品纯度为40.9％。
　　 红龙果红色素HPLC-MS分析条件为：（1）质谱检测条件为ESI+模式；毛细管电压3.5 KV；干燥气体（氮气）温度为325℃，喷雾器压力为40 psi，流速为10 L/min；质量扫描范围为100 m/z～900 m/z。（2）最佳色谱条件为选用Waters Atlantis dC18色谱柱（250×4.6 mm I.d.，5 μm），流动相A为0.2％甲酸-水溶液，流动相B为乙腈，设定柱温30℃，进样量为20 μL，在流速为1 mL/min的条件下进行梯度洗脱；梯度洗脱程序为(min/B％)：0/0，4/0，7/7，24/9，30/9，35/10，40/10，60/15，70/100；检测波长为280 nm、405 nm、476 nm、538 nm。在此条件下分离分析红龙果红色素，鉴定出10种化合物，主要为甜菜红苷。
　　 红龙果红色素的热降解符合动力学一级反应，通过测定不同温度及不同pH值条件下红色素含量的变化，建立了红色素降解的预测模型；红色素对热敏感，在碱性条件下不稳定，pH值为4.0～5.0之间时最稳定；在果汁饮料加工常用的糖浓度（0％～12％）范围内，糖对红龙果红色素的稳定性没有影响；金属离子对红龙果红色素的稳定性有一定的影响，Fe2+可促进红龙果红色素的降解，Ca2+、Mg2+和Zn2+都对红龙果红色素有一定的护色作用；氧化剂H2O2可导致红龙果红色素快速降解，而VC和Na2SO3对红龙果红色素有护色作用；共色物质方面，芦丁对红龙果红色素的稳定性没有影响，而单宁、茶多酚、没食子酸对红龙果红色素皆有护色作用。
　　 红龙果红色素对DPPH、OH·和O2-·均具有一定的清除活力，其IC50值分别为20.99 mg/L、142.37 mg/L和9000 mg/L；红龙果红色素的总抗氧化能力为32.66 U/mg，具有较强的抗氧化活性。红龙果红色素对HL-60细胞的增殖起到显著的抑制作用，用含有一定浓度红色素的培养基培养HL-60细胞48 h和72 h时，最高抑制率分别为87.25％和87.53％；红龙果红色素还可引起HL-60细胞的凋亡，浓度为0.25 mg/mL的红龙果红色素溶液可使细胞呈现明显的凋亡形态，浓度为2.0 mg/mL和2.5 mg/mL时，引起HL-60细胞的大量死亡。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:缩略语表

声明

第1 章 引言

第2 章 大孔吸附树脂分离纯化红龙果红色素

第3 章 红龙果红色素的HPLC-MS 分析

第4 章 红龙果红色素的稳定性研究

第5 章 红龙果红色素的生物活性研究

第6 章 总结与展望

致 谢

参考文献

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