电针“长强”穴对自闭症模型大鼠海马区BDNF、TrKB蛋白表达和学习记忆的影响

摘要

目的:观察电针“长强”穴对自闭症模型大鼠海马区BDNF、TrKB蛋白表达及其学习记忆的影响。
　　方法:选取清洁级健康成年Wistar雄性及雌性大鼠各10只，雌、雄各一只于傍晚19:00合笼过夜。检查到阴栓的雌鼠记为胚胎第0.5天，分笼单独饲养。将受孕母鼠按随机数字表法分成两组，一组在怀孕12.5天时给予母鼠ip600 mg/kg的VPA腹腔注射，为模型组;另一组正常饲养，为常规饲养组。模型组母鼠产下的子鼠为VPA模型组大鼠;常规饲养组母鼠产下子鼠为空白组。产下的子鼠经发育行为学测评，筛选出自闭症大鼠，再予Morris水迷宫试验测试其学习记忆能力。随机挑选36只符合标准的VPA大鼠分为长强组、非穴组、模型组每组12只;常规饲养组子鼠随机挑选12只作为空白组。长强组取“长强”穴，非穴组取右侧胁下固定非经非穴点，予电针连续刺激(连续波，频率为2Hz，强度为2mA)20min后出针，连续治疗20d为1个疗程，共1个疗程;非穴组操作同电针“长强”组;空白组和模型组在同等条件下饲养，不予任何干预。疗程结束后再予Morris水迷宫测试，后立即取海马组织，用免疫印迹法观察海马区BDNF、TrKB蛋白的表达情况。
　　结果:1.Morris水迷宫检测结果显示:干预前:与模型组相比，空白组逃避潜伏期较短，有显著性差异(P＜0.05);与空白组相比，长强组、非穴组逃避潜伏期延长(P＜0.05);穿越平台次数各组间无明显差异。干预后:与模型组相比，长强组、空白组逃避潜伏期缩短(P＜0.05）;与空白组相比，非穴组逃避潜伏期延长(P＜0.05）;与模型组相比，空白组、长强组穿越平台次数增加(P＜0.05）;各组干预前后组内有明显差异(P＜0.05）。
　　2.免疫印迹:与模型组相比，空白组、长强组BDNF、TrKB蛋白在海马区相对体积较高（P＜0.05）;非穴组BDNF、TrKB蛋白在海马区相对体积与模型组接近（P＞0.05）。
　　结论:电针“长强”穴可增强VPA自闭症模型大鼠海马区BDNF、TrKB蛋白表达，进而改善学习记忆能力。

目录

声明

摘要

前言

第一章 实验材料与方法

1 实验材料

1．1 实验试剂

1．2 实验设备

2 实验方法

2．1 动物模型制备及实验动物分组

2．2 发育行为测试

2．3 热板致痛试验

2．4 游泳行为实验

2．5 Morris水迷宫干预前测试

2．6 电针干预

2．7 Morris水迷宫干预后测试

2．8 BDNF、TrKB免疫印迹检测

3 统计分析方法

4 技术路线图

第二章 结果

1 两组子鼠发育情况比较

1．1 体重测定结果

1．2 倾斜板试验结果

2 热板致痛试验结果

3 游泳行为实验结果

4 Morris水迷宫实验结果

4．1 定位航行实验结果

5 BDNF、TrKB免疫印迹检测结果

第三章 讨论

1 重复自闭症模型

2 中医对自闭症的认识及长强穴的选择

3 团队前期对自闭症的研究

4 指标BDNF、TrKB的选取

5 电针对自闭症模型大鼠海马区BDNF、TrKB蛋白表达及学习记忆影响

6 不足与展望

结论

参考文献

附录

致谢

文献综述 针刺治疗自闭症的研究进展

作者简历