沙门氏菌耐药基因多重PCR检测方法的建立

摘要

目的：建立检测沙门氏菌耐药基因的多重PCR方法。方法：在已有的单一PCR检测沙门氏菌耐药基因的基础上,采用正交试验设计法,对Mg2+、dN(O)Ps和引物浓度比例以及退火温度进行优化,确定沙门氏菌耐药基因多重PCR最佳反应体系和条件,并运用多重和单一PCR同步比较检测细菌耐药基因.结果：成功建立了氨基糖苷类药物耐药基因aph (3)-Ⅱa、aadA2、aacC4三重PCR方法、氯霉素类药物耐药基因flor、cmlA、catI三重PCR方法、四环素类药物耐药基因teTa、tetB二重PCR疗法,且多重和单一PCR同步检测相关耐药基因结果符合率达100％。结论：建立的多重PCR具有特异、快速、简便的特点,可为沙门氏菌耐药基因的检测以及耐药性的监控提供技术支撑.