结核耐药基因多重荧光定量PCR快速检测方法的建立

摘要

目的 构建快速检测出结核分枝杆菌耐药基因的三重荧光定量PCR体系.方法 分别针对结核3个主要耐药基因rpoB,katG,rpsL设计特异性引物与TaqMan MGB探针,构建并优化单管同时检测此3个突变点的三重荧光定量PCR体系,验证方法的特异度、敏感度和稳定性.结果 成功构建了三重荧光定量PCR体系,可以检测到10 CFU/μL结核杆菌.结论 该实验建立结核耐药基因三重荧光定量PCR具有良好的特异度,敏感度和重复性.该方法对快速检测结核耐药有重要意义.