HCV核心蛋白调控SREBP-1c表达水平的机制研究

摘要

目的:探讨HCV核心蛋白调控SREBP-1c的分子生物学机制。方法:构建HCV核心蛋白真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)-Core(1b,3a),转染HepG2细胞系,48h后提取细胞总RNA和总蛋白,采用real time PCR、Western blot等方法检测脂代谢相关基因Sirt1和SREBP-1c的mRNA和蛋白表达水平；构建pmirGLO-SREBP-1c-3'-UTR报告基因表达载体,与pcDNA3.1/myc-His(-)-Core(3a)共转染HepG2细胞系48h后检测SREBP-1c-3’-UTR相对luciferase活性.结果：与对照组相比，HCV核心蛋白表达组SREBP-1c-3’-UTR相对luciferase活性下调(相对值为0.667,n=3,p<0.05)。结论：表达1b型和3a型HCV核心蛋白后可上调SREBP-lc和Sirt 1的mRNA及蛋白表达水平，通过Luciferase assay发现:microRNA在核心蛋白对SREBP-lc的调控过程中发挥了抑制作用，提示核心蛋白对SREBP-1。的调控错综复杂，既有正向激活作用也有反向抑制作用，最终SREBP-lc的上调是其综合作用的结果。