poly(I:C)诱导负载HPV E744-62多肽的脐血DCs体外抗宫颈癌免疫效应研究

摘要

目的:观察poly(I:C)诱导负载HPV E744-62多肽的人脐血DCs体外抗宫颈癌的免疫效应.rn 方法:对采集健康足月妊娠孕妇的脐带血,密度梯度离心法分离获得脐血单个核细胞,取贴壁细胞体外经rhGM-CSF、rhIL-4诱导培养7天获DCs.分别用poly(I:C)、HPVI6 E744-62多肽、poly(I:C)联合HPVI6 E744-62多肽来刺激DCs,设未经抗原负载的DCs作为对照组.观察细胞形态,收集培养9天的各组DCs,采用流式细胞仪检测DCs相关表型:CDI α、HLA-DR、CD40和CD83;ELISA法检测DCs上清中IL-12、IL-10的含量,混合淋巴细胞反应测定各组DCs体外刺激T细胞增殖的能力,ELISA法检测T细胞培养上清液中的IFN-γ含量,MTT法检测CTL对宫颈癌细胞系CaSki的杀伤效应.rn 结果:各组DCs均可诱导分化为一定数量的具有典型形态和表型的DCs.以HPVI6 E744-62多肽联合poly(I:C)组最高.与未经抗原负载的DCs相比,其他各组抗原刺激的DCs数量、表型CDIα、HLA-DR、CD40和CD83表达率、分泌IL-12的能力、刺激同种异体T细胞增殖能力、分泌IFN-γ水平及激活的CTL对CaSki细胞杀伤力均较高,尤其是以HPVI6 E744-62多肽联合poly(I:C)组效果最明显,同时其分泌IL-10水平亦最低.rn 结论:负载HPVI6 E744-62多肽的脐血DCs体外可诱导特异性杀伤宫颈癌细胞的免疫效应,poly(I:C)作为免疫佐剂可增强抗肿瘤免疫反应.