hUC-MSCs海藻糖4℃冷藏保护液研制及保存效果评价

摘要

本文着重进行了MSCs 4℃冷藏保护液的研制,筛选出了一种无DMSO和动物血清的4℃冷藏保护液.该冷藏保护液以无毒无害的海藻糖为低温保护剂,悬浮在该保护液中人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)在4℃保存3周后,MSCs存活率仍维持在70％.浓度筛选实验,发现保护液中海藻糖的浓度为40mM时,细胞存活率较高,悬浮于该保护液中的hUC-MSCs,4℃保存7天,活细胞率为92.7±1.5％,保存3周,活细胞率为70％.体外再培养实验结果表明,4℃保存的人间充质干细胞再培养后,细胞的贴壁、增殖、分化和迁移功能正常.细胞表面标志物表达正常,依旧呈现CD29、CD44、CD73及HLA-ABC (MHC class Ⅰ)阳性,CD14,CD31,CD34及CD45阴性的特性.细胞分化功能分析实验也证实,4℃冷藏保存的MSCs具有经诱导向脂肪和成骨细胞分化的能力.rn 综上所述,使用研制出的4℃冷藏保护液,可实现MSCs在4℃保存3周,为MSCs应用于临床治疗提供方便.