大黄鱼肾脏组织细胞系YCK的建立

摘要

大黄鱼(Larimichthys crocea)是福建省最重要的经济性鱼类之一,本文以大黄鱼肾脏组织为材料,进行了组织细胞体外培养条件的探索,构建了大黄鱼体细胞体外培养的技术体系,并在此基础上建立了大黄鱼肾组织细胞系YCK.该细胞系的标准培养方法是使用添加10％胎牛血清(FBS)的M-199,在27°C下进行密闭培养.该细胞系主要由上皮样细胞构成,在上述培养条件下生长旺盛,经过400余天的连续培养,已经成功传代超过70次,第65代YCK细胞的群体倍增时间为36.12h.针对常用的鱼类细胞培养基进行了适应性筛选,确认M-199是最适合该细胞系的培养介质,也可适用于其他大黄鱼细胞的培养.对该细胞系的染色体分析表明:虽然出现了异倍化现象,但其依然是符合2n=48的二倍体细胞系.该细胞系的建成为大黄鱼病毒性病原的研究及相关疾病的诊断提供了有力的技术支持.