广地龙饮片的HPLC特征图谱及5个核苷类成分的测定

摘要

目的:建立广地龙饮片及其2种常见伪品的HPLC特征图谱并测定其中尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、腺苷、肌苷的含量,为广地龙饮片的真伪鉴别和质量控制提供参考. 方法:采用Thermo TSK-GEL C18柱(4.6×250mm,5μm),以0.1％甲酸水溶液(A)和甲醇(B)为流动相,99％A等度洗脱40分钟,流速为1.0mL·min-1,检测波长260nm,柱温30°C,进样量10μL.采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"建立指纹图谱并进行相似度评价,并对尿嘧啶,次黄嘌呤,黄嘌呤,腺苷和肌苷的含量测定进行方法学考察. 结果:建立了广地龙饮片及其伪品的特征图谱,正品(参环毛蚓)中标定了7个共有峰,伪品大腔蚓和暗孔远盲蚓中均标定了8个共有峰.对不同来源的广地龙饮片及其伪品中5种核苷成分进行含量测定.尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、腺苷、肌苷线性范围分别为3.40～170μg·mL-1;4.40～220μg·mL-1;5.00～250μg·mL-1;3.40～170μg·mL-1;4.20～210μg·mL-1.线性关系良好(r≥0.9999);重复性和稳定性的RSD值均＜2.98％,平均加样回收率在96.38～105.48％之间.18批广地龙饮片中均未检测到腺苷,尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、肌苷含量分别为0.021～0.408mg·g-1、0.309～16.133mg·g-1、0.825～4.714mg·g-1和1.413～23.382mg·g-1. 结论:所建立特征图谱专属性强,结合5个主要成分含量测定能够为广地龙饮片的真伪鉴别和质量控制提供科学依据.