摘要：目的:通过筛选鸡骨草叶中N-反式对香豆酰酪氨酸纯化富集工艺,建立其含量测定方法,并对不同来源鸡骨草和毛鸡骨草进行含量分析,为N-反式对香豆酰酪氨酸的开发利用和鸡骨草叶质量评价提供参考依据. 方法:以聚酰胺树脂为材料,采用柱层析法筛选N-反式对香豆酰酪氨酸最佳纯化富集工艺;以N-反式对香豆酰酪氨酸含量和干膏纯度为指标,采用高效液相色谱法进行样品分析,色谱条件为:Hypersil BDS C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相0.1％甲酸水(A)-甲醇(B),梯度洗脱(0～20分钟,33％B→51％B),流速1.0mL/min,柱温25°C,检测波长300nm,进样量10μL. 结果:建立了N-反式对香豆酰酪氨酸的最佳纯化富集工艺:鸡骨草叶提取后制成浓度为0.02～0.06g/mL溶液,量取50mL上聚酰胺树脂柱5.0g(直径2.5cm,长40cm),静置20min,依次用含水(含0.1％乙酸)、20％乙醇(含0.1％乙酸)和pH=10的氨水洗脱至流出液无色,收集全部氨水洗脱液.N-反式对香豆酰酪氨酸在2.575～51.5μg内线性关系良好,线性回归方程为y=441.34X-8.2594(r=0.9999),平均加样回收率为99.38％(RSD2.06％).24个不同样品中N-反式对香豆酰酪氨酸含量在3.18～31.85mg/g之间,干膏纯度在4.95～61.99％之间,N-反式对香豆酰酪氨酸含量和干膏纯度呈现一定线性关系,线性回归方程为Y=1.7115X+0.496(r=0.8341). 结论:本文方法简便准确、分离度好、专属性强,可用于鸡骨草叶中N-反式对香豆酰酪氨酸的纯化富集、含量分析,为N-反式对香豆酰酪氨酸单体提制和开发利用及鸡骨草叶质量评价提供了指导价值.
