鸭疫里默氏杆菌OmpA/motb蛋白的表达纯化及免疫学特性分析

摘要

本研究对血清1型鸭疫里默氏杆菌CH3株的ompA/motb基因核苷酸序列及其蛋白进行生物学信息分析后,用PCR技术扩增获得去除信号肽编码区段的ompA/motb基因,并构建重组表达质粒pET30a-OmpA/mtob,成功表达分子量约为55kDa的重组蛋白rOmpA/motb.rOmpA/motb能与血清1、2、10和15型RA阳性血清发生特异性反应,表明OmpA/motb具有交叉免疫原性.以纯化的rOmpA/motb免疫新西兰大白兔,经三次免疫后兔血清中抗OmpA/motb蛋白的抗体效价为1:256,000;Western blot结果显示OmpA/motb兔多抗可与血清1型、2型、10型和15型RA菌株发生特异性结合反应,与其他菌株无反应性.本研究制备的RA OmpA/motb多克隆抗体具有良好的反应性及特异性,为进一步研究OmpA/motb蛋白的免疫学功能及建立鸭疫里默氏杆菌病的诊断方法奠定了基础.