鸭源鸡杆菌外膜蛋白A的原核表达及免疫保护性分析

摘要

为评价鸭源鸡杆菌(Gallibacteriumanatis,G.anatis)外膜蛋白A(Outer membrane proteins A,OmpA)的免疫原性及免疫保护力,本研究通过PCR技术扩增去除信号肽的ompA基因序列,酶切后与载体pET32a(+)连接,构建重组表达质粒pET32a(+)-OmpA,在IPTG诱导下成功表达约40kDa的包涵体蛋白.Wester blotting分析显示重组蛋白rOmpA具有抗原性;以纯化的rOmpA免疫小鼠,分别在一免两周和四周后进行加强免疫.三免后进行抗体检测并以G.anatis PDS-RZ-1-SLG株的5×LD50攻毒,同时设立全菌灭活组和PBS组作为对照.结果显示rOmpA可诱导小鼠产生较高水平的抗体,可提供50％的免疫保护力.以上结果表明鸭源鸡杆菌外膜蛋白A是一种保守性共同抗原,可作为鸭源鸡杆菌疫苗的候选抗原.