抗庆大霉素禽源单链抗体的制备及ic-ELISA和FPIA检测方法的建立

摘要

目的：本研究旨在制备抗庆大霉素(Gentamicin,Gent)禽源单链抗体,从而建立快速检测Gent的ic-ELISA和FPIA检测方法. 方法：利用噬菌体展示技术筛选出两株特异性较高的禽源scFv(S-1和S-5). 结果：间接竞争ELISA(ic-ELISA)检测时,S-1和S-2的IC50分别为12.418ng/mL和14.674ng/mL.与卡那霉素和阿米卡星的交叉反应不超过0.04％,添加回收检测显示组内回收率在70.70％～118.09％之间,组间回收率在60.91％～118.04％之间.荧光偏振(FPIA)检测时,scFv的IC50为4.98±0.7μg/mL,最低检测限为0.16μg/mL,检测范围(IC20～IC80)为0.59～57.56μg/mL. 结论：本研究成功建立了基于抗庆大霉素禽源scFv的ic-ELISA和FPIA检测方法,论证了这一新型抗体研发平台与不同免疫检测技术相结合,在药物残留检测中的可行性.