还脑益聪方提取物对淀粉样前体蛋白/早老蛋白1双转基因小鼠行为学的影响及作用机制

摘要

目的：探讨还脑益聪方提取物对淀粉样前体蛋白/早老蛋白1(APP/PS1)双转基因小鼠学习记忆的改善及其作用机制. 方法：3月龄APP/PS1双转基因小鼠60只,随机分为4组:模型对照组(予等体积蒸馏水),阳性药物对照组(盐酸多奈哌齐0.65mg/kg/d),还脑益聪方(5.46g/kg/d)低剂量组,还脑益聪方(10.92g/kg/d)高剂量组;以同遗传背景的C57BL/6J小鼠15只为正常对照组,连续灌胃6个月,以Morris水迷宫检测小鼠行为学,尼氏染色观察小鼠海马神经元病理形态学变化,免疫组织化学检测小鼠海马组织APP及Aβ表达,双荧光素酶报告基因检测小鼠海马组织γ分泌酶活性,蛋白免疫印迹检测小鼠海马组织APH-1a、HIF-1α、PEN-2、CREB蛋白表达,实时荧光定量反转录聚合酶链反应检测小鼠海马组织APH-1a、HIF-1α、PEN-2、CREB的mRNA表达. 结果：还脑益聪方提取物可以显著缩短APP/PS1双转基因小鼠在Morris水迷宫实验中的潜伏期,增加穿台次数;明显改善海马CA1区神经元及尼氏体的数量和形态结构,保护神经元及尼氏体,促进蛋白质的合成;显著降低海马CA1区γ分泌酶活性,磷酸化APP、Aβ1-40及Aβ1-42的表达;显著降低海马PEN-2、CREB蛋白及mRNA表达;对APH-1a、HIF-1α蛋白及mRNA表达均无明显改变. 结论：还脑益聪方提取物可以明显改善APP/PS1双转基因小鼠的记忆功能,其作用机制与保护神经元及尼氏体结构,抑制CREB的活性进而下调PEN-2的表达来抑制Y分泌酶的活性,减少APP的裂解和Aβ(尤其是Aβ-42)的产生相关.