HaSNPV几丁质酶基因在毕赤酵母中的表达条件初探

摘要

本论文采用由本实验室重组、筛选的菌株GS 115-pPIC9k-ChiA、空白对照菌株GS 115-Ppic9k通过摇床发酵诱导培养，对诱导剂甲醇浓度、诱导前培养时间、诱导时间、摇床转速和发酵温度进行单因素实验，诱导后取发酵液上清采用改良的Schales方法对诱导表达后的几丁质酶酶活性测定，从而达到对表达条件进行初步优化的目的。综合以上单因素实验的结果分析，HaSNPV几丁质酶基因以毕赤酵母为表达载体时，对表达最终水平影响最大的因素是甲醇的添加量、开始添加的时间和持续诱导的时间，当培养基中始终有甲醇存在时，几丁质酶的表达水平较高。