KlPMR1基因的敲除对乳酸克鲁维酵母GG799表达腺苷酸脱氨酶的影响

摘要

本研究敲除乳酸克鲁维酵母Kluyveromyces lactis GG799的KlPMR1基因,并对比敲除型和野生型酵母腺苷酸脱氨酶表达水平和生长状态的变化.结果显示在培养基中含有10mmol·L-1CaCl2的情况下,两者生长速度基本一致,但在培养基中未外源添加CaCl2的情况下,敲除型重组酵母生长受到抑制;培养基中添加CaCl2的情况下摇瓶培养120h后,敲除型重组酵母胞外腺苷酸脱氨酶酶活为516u/mL,野生型重组酵母为1096u/mL.当在培养基中含有10mmol·L-1EGTA的情况下,摇瓶培养120h后,敲除型重组酵母胞外腺苷酸脱氨酶酶活为12u/mL,野生型重组酵母为43u/mL.结果说明敲除KlPMR1基因并不能增强乳酸克鲁维酵母GG799对鼠灰链霉菌来源的腺苷酸脱氨酶的表达水平,并且缺少钙离子时,该酶的在GG799中的表达受到明显抑制.