雷帕霉素通过诱导细胞凋亡和增强自噬逆转急性淋巴细胞白血病细胞株对糖皮质激素耐药

摘要

目的：以T-ALL GC耐药细胞株CEM-C1-15(C1)和同一父本来源的GC敏感细胞株CEM-C7-14(C7)为研究对象,探讨雷帕霉素对T-ALL的自噬作用及与雷帕霉素逆转GC耐药之间的关系.方法：以T-ALL GC耐药细胞株C1及GC敏感细胞株C7为研究对象.MTT比色法检测细胞增殖,Western Blot分析自噬相关蛋白及mTOR通路蛋白的表达,流式细胞术检测凋亡和细胞周期.结果：1.10nM雷帕霉素对C1及C7的生长均有明显抑制作用,呈时间依赖性,雷帕霉素作用24h和48h细胞存活率较对照组比较明显降低(P＜0.05);2.10nM雷帕霉素与1μM地塞米松联用,对C1及C7的生长抑制作用增强,其协同作用在GC耐药细胞株C1尤其明显.24h和48h雷帕霉素+地塞米松组细胞存活率较雷帕霉素组或地塞米松组或对照组比较均明显降低(P＜0.05);3.10nM雷帕霉素作用于C1细胞株24h,下调mTOR通路下游蛋白p70S6K和4E-BP1磷酸化水平;4.10nM雷帕霉素作用于C1和C7凋亡细胞百分率无明显增加;10nM雷帕霉素与1μM地塞米松联用,C1和C7凋亡细胞百分率较对照组或雷帕霉素组或地塞米松组均明显增加;5.10nM雷帕霉素或10nM雷帕霉素+1μM地塞米松作用于C1和C7,G1期细胞百分率明显增加;6.10nM雷帕霉素或10nM雷帕霉素+1μM地塞米松均上调自噬相关蛋白Beclin-1和LC3-Ⅱ/Ⅰ的表达,加用自噬抑制剂3-MA后可阻断雷帕霉素对自噬相关蛋白Beclin-1和LC3-Ⅱ/Ⅰ的上调.结论：雷帕霉素可逆转T-ALL GC耐药细胞株C1对糖皮质激素耐药,其机制为雷帕霉素与地塞米松联用诱导细胞凋亡和增强自噬,并阻滞细胞周期于G1期.