细菌对四环素类药物耐药基因三重PCR检测试剂盒研究和应用

摘要

本实验旨在研制一种细菌对四环素类药物耐药基因三重PCR快速检测试剂盒,用于快速、准确的检测各种细菌中的四环素类药物耐药基因。根据对GenBank上已注册的四环素类耐药基因tetA、tetC、tetM的多条基因序列进行分析,设计引物.使用三重PCR法快速检测标准菌株中的耐药基因,在此基础上不断优化各种反应条件研制出三重PCR检测试剂盒.用本实验研制的试剂盒检测了从全国16个省市规模化猪场、鸡场粪样中分离的248株大肠杆菌和沙门氏菌,并将检测结果与药敏实验结果相比较。结果：试剂盒能够准确的检出三种耐药基因,从而探明四环素类药物耐药基因的流行规律与趋势。与传统方法相比,本试剂盒能大大缩短检测时间,节省检测成本.应用实验显示,基因检测与药敏实验符合率为66％,两种方法具有较高的一致性。目前,国内并没有类似的四环素类药物耐药基因三重PCR快速检测试剂盒,本实验的研究结果填补了这一项空白。