子痫前期胎盘组织比较蛋白质组学研究

摘要

目的:分析子痫前期和正常足月妊娠胎盘组织差异蛋白,为研究子痫前期发病机制提供线索.方法:1、采取病例对照研究,选取子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织标本,提取胎盘总蛋白,双向凝胶电泳的第一向电泳采用固相pH梯度电泳,第二向采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胎盘组织总蛋白质成份,然后进行硝酸银和考马斯亮蓝染色.通过ImageMaster软件进行图像分析,并通过统计学分析方法评价双向凝胶电泳结果.2、通过比较子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织的双向电泳图谱,筛选出有差异的蛋白质点进行胶内胰蛋白酶解,经过基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF/TOF-MS)对差异表达相差2倍以上的蛋白质点进行鉴定,检索蛋白数据库确定匹配蛋白.应用生物信息学技术对差异蛋白进行结构和生物学功能分析和预测.3、应用SPSS软件(17.0版)对数据进行整理分析,对比差异性.结果：Western blot和免疫组化结果显示Vimentin在子痈前期组胎盘组织中呈低表达，与正常妊娠组差异有统计学意义( P<0.05 )，与蛋白质组学结果一致。Western blot和免疫组化结果显示HPL在子痛前期组胎盘组织中呈低表达，与正常妊娠组差异有统计学意义(P<0.05 )，与蛋白质组学结果一致。结论:二维凝胶电泳、基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱技术方法应用于分离、鉴定人类胎盘表达蛋白的情况是可行的。发现差异表达2倍以上蛋白15个，经质谱分8个点获得鉴定，下调表达的蛋白点7个。这些差异蛋白在上述组织中的表达变化需要进一步实验验证。胎盘组织中Vimentin, HPL存在差异表达，差异表达水平与蛋白质组学结果基本一致。