高效液相色谱质谱联用法复合干扰素二硫键定位分析

摘要

本文利用高效液相色谱质谱联用技术进行了复合干扰素二硫键定位分析.经二硫苏糖醇处理后复合干扰素分子量由19429Dal增加到19433Dal,表明该蛋白中含有两对二硫键.利用胰蛋白酶对复合干扰素进行酶切处理,多肽混合物经液质联用分析得到离子m/z1051.5,精确质量数扫描表明该离子带两个正电荷.该离子经二硫苏糖醇还原其二硫键后得到离子m/z895.1和m/z1210.4,二级质谱分析结果表面离子m/z895.1是序列为ISPFSC29LK的多肽,离子m/z1210.4是序列为YSPC139AWEVVR的多肽.由于每个肽段中只含有一个半胱氨酸,因此在Cys29-ys139之间存在一对二硫键,另一对二硫键位于Cys1-Cys99.