美妥珠(HcHAb18)单抗质量标准的建立及理化对照品结构确证

摘要

目的:建立美妥珠单抗的质控方法和质量标准.方法:利用乳酸脱氢酶检查外周血分离的单核细胞对人肺腺癌A549细胞的杀伤效应测定美妥珠单抗的生物学活性;非还原CE－SDS和SEC－HPLC测定纯度;胰酶酶切,HPLC测定其肽图;实时定量PCR检测CHO宿主DNA残留量;采用ELISA法分别测定抗原CD147结合力、残留ProA含量和残留宿主蛋白含量;CE－SDS法测定等电点;液质联用技术进行分子量、肽图及糖型分析;其余检测项目按中国药典2010年版三部规定进行.结果:用建立的方法对美妥珠单抗的成品进行了检定,各项指标均符合《人用重组DNA制品质量控制技术指导原则》、《人用单克隆抗体质量控制技术指导原则》和中国药典2010年版三部的要求;对理化对照品进行了一级结构确证,分子量、氨基酸序列糖型分析结果均与理论预测相符.结论:建立的质控方法和质量标准具有保证产品安全、有效、质量可控的特点,可用于该类产品的常规检定.