神经元内JNK/c-jun信号通路对nNOS基因调控作用的研究

摘要

目的:本实验探讨PC12细胞JNK/c-jun信号通路对nNOS基因调控作用.方法:体外培养分化的PC12细胞,免疫组化检测PC12细胞内JNK/c-jun,p-c-jun及nNOS定位表达,同时应用SP600125抑制JNK/c-jun信号通路,MTT法检测不同浓度SP600125对分化的PC12细胞活力的影响,Westem-blot检测SP600125对JNK/c-jun,p-c-jun,nNOS基因表达的影响,验证c-jun和nNOS之间的关系.结果:全部分化的PC12的细胞核都表达c-jun蛋白,部分细胞表达p-c-jun,全部分化的PC12的细胞胞浆均表达nNOS蛋白.50μmol/L和100μmol/L SP600125明显降低了细胞活力(P＜0.05),50μmol/L的SP600125能有效抑制c-jun的磷酸化,即p-c-jun的表达(P＜0.05),而对c-jun的表达无影响(P＞0.05),同时引起nNOS蛋白表达的上调(P＜0.05).结论:c-jun,p-c-jun,nNOS蛋白共表达于分化的PC12细胞中, SP600125有效抑制了c-jun的磷酸化激活,JNK/c-jun1信号激活的抑制同时上调了nNOS的表达.这些结果表明神经元内JNK/c-jun信号通路对nNOS基因具有调控作用.