猪乙型脑炎病毒RT-LAMP检测方法的建立和应用

摘要

为建立一种简单,快速,灵敏,特异性好的猪流行性日本乙型脑炎病毒(JEV)的检测方法,本研究根据Genbank登录的SA14-14-2疫苗株及SA14毒株的E基因组序列,利用在线软件Primer Explorer V3设计了6条特异性引物,优化反应体系,建立了环介导等温扩增(LAMP)检测方法。该方法灵敏度高、特异性强、方便快捷,在1 h～2 h内即可得到结果,被用于多种病毒的检测。该方法成本低,只需一个水浴锅即可完成实验,又可省略琼脂糖凝胶电泳步骤,更适合基层实验室应用。结果判定时只需要在扩增产物中加入SYBR GreenⅠ染料,就可以直接在可见光或紫外光下观察颜色变化。该方法省时省力,是一种适用于基层实验室快速、准确诊断流行性JEV的方法。