奶山羊泌乳期乳腺组织microRNA表达谱分析及miR-143调控IGFBP5对细胞作用研究

摘要

本研究以5只不同泌乳时期的崂山奶山羊乳腺组织为研究材料，采用Illumina/Solexa高通量测序技术对构建的三个文库分别进行测序，并对测序数据进行了质量检测和长度分布统计，基因组定位及小RNA分类注释，筛选出了三个文库中差异表达的miRNA。发现miR-143在不同泌乳时期具有高表达丰度且呈现差异表达模式，生物信息学分析表明:其靶基因参与了乳腺的发育、细胞生长等生物学过程，采用双荧光素酶报告基因分析系统和qRT-PCR对miR-143及其潜在靶基因IGFBPS进行了靶向调控关系研究，采用MTT法、荧光Hoechst/PI双染和流式细胞术研究了miR-143对乳腺上皮细胞增殖与凋亡的影响。主要研究结果如下:1、miR-143靶向IGFBPS 3-UTR，并正向调控其表达；2、miR-14343延缓了乳腺上皮细胞周期进程，可抑制乳腺上皮细胞的增殖；3、miR-143可促进体外乳腺上皮细胞凋亡，并对凋亡标志基因BAX/BCL-2产生显著影响。