大熊猫白细胞介素-18功能分析

摘要

白细胞介素-18(Interleukin-18,IL-18),最早称为IFN-γ诱导因子,分离自小鼠肝脏,在疮疱丙酸杆菌和LPS刺激下能够诱导IFN-γ大量表达.研究发现IL-18是一种多效性细胞因子,可诱导T细胞、NK细胞增殖、成熟,刺激Thl细胞分泌多种细胞因子,增强Fas/FasL介导的细胞毒活性.在临床上可能作为一种潜在的抗感染和抗肿瘤的多肽制剂.大熊猫是中国特有的珍稀濒危野生动物,研究大熊猫免疫功能对于保护大熊猫有重大的意义.本实验室以成都动物园成年大熊猫血液样本淋巴细胞为材料,利用大熊猫基因组数据,构建本地Blast库,克隆得到全长cDNA和基因组gDNA,命名为AmIL-18.多序列对比显示,AmIL-18无典型信号肽区域,在Asp-Tyr位点酶切后形成活性成熟肽.其与各种哺乳动物同源性为62%-86%,与鱼类同源性仅有23%-26%。进化树显示其遗传距离与犬最为接近,该结果与物种进化关系一致.构建真核表达质粒,并注入小鼠体内检测其对免疫应答的影响.经过数周取样分析发现该质粒佐剂能过明显提高小鼠Thl免疫应答效应和T淋巴细胞刺激指数,同时CD4+和CD8+细胞比例也呈上升趋势。结果表明该基因佐剂可以作为一种良好的免疫增强剂。