NOX4与TGF-β对A549细胞迁移的影响

摘要

目的：探讨NOX4与TGF-β对A549细胞迁移的影响. 方法：实验分组：TGF-β组,空白对照组,DPI组(抑制剂NOX4组),TGF-β+DPI组,DMSO组(溶剂对照组).用划痕实验的愈合率代表A549细胞的迁移水平,RT-PCR检测NOX4mRNA的水平,流式细胞仪检测ROS表达,Western blot检测NOX4、snail、E-cadherin蛋白的表达量. 结果：DPI抑制组与空白对照组比较,TGF-β+DPI组与TGF-β组比较,前者NOX4mRNA与蛋白表达量以及ROS的产量均低于后者(P<0.05).EMT相关蛋白表达的变化：TGF-β组与DMSO组比较,snail蛋白表达上升,E-cadherin蛋白表达下降;DPI组与DMSO组比较,TGF-β+DPI组与TGF-β组比较,snail蛋白表达下降,E-cadherin蛋白表达上升.划痕实验结果显示：DPI组和空白对照组比较,TGF-β+DPI组与TGF-β组比较,划痕愈合率均降低,表明DPI可以抑制由TGF-β诱导A549细胞的迁移.细胞形态学显示,正常对照组和DMSO组相比形态学无差异,TGF-β组刺激的细胞形态学上相比正常对照组和DMSO组细胞间粘连变低,细胞变的更加的细长,趋向于间充质细胞的形态. 结论：TGF-β刺激A549细胞后,细胞迁移能力增强.DPI抑制NOX4的表达后,TGF-β诱导的A549迁移被抑制,并且与TGF-β诱导的EMT进程有关.