葡萄球菌肠毒素基因芯片检测与分型技术研究

摘要

针对Genbank公布的17种葡萄球菌肠毒素基因,设计筛选34条特异性探针、2条通用探针和3条质控探针在空白玻片上按点阵分布点样.采用1对通用引物和17对特异性引物对目的片段进行多重不对称PCR扩增,通过核苷酸杂交、清洗和结果扫描,建立基因芯片检测技术,并进行芯片检测技术的有效性、敏感性、特异性试验.结果表明,该基因芯片检测方法与肠炎沙门菌、痢疾志贺菌、副溶血性弧菌、奇异变形杆菌、肠毒素型大肠埃希菌等常见菌无交叉反应,检测葡萄球菌菌落灵敏度达到3.8×102cfu/mL,可同时检测并对17种葡萄球菌肠毒素基因型进行分型鉴定.该基因芯片检测方法是一种快速、准确对葡萄球菌肠毒素进行检测和分型的高通量方法.