鳖甲煎改良方对肝星状细胞生长及TGFβ1、Smad3与Smad7表达的影响

摘要

目的：探讨鳖甲煎改良方(modified turtle shell decoction,MTSD)对肝星状细胞T6(hepatic stellate cell T6,HSC-T6)的TGFβ1、Smad3及Smad7表达的影响. 方法：将含生药量为0.71g/ml的MTSD处理HSC-T6作实验组,以和MTSD剂量相同的鳖甲煎丸(turtle shell pills,TSP)处理的HSC-T6为阳性对照,常规培养的HSC-T6作正常对照.倒置显微镜下观察比较各组HSC-T6的形态变化.CCK-8检测各组HSC-T6细胞的生长情况,并绘制其生长曲线;采用Real time-PCR、免疫荧光细胞化学及Western blotting技术分别检测各组HSC-T6的TGFβ1、Smad3及Smad7基因及其编码蛋白的表达变化. 结果：倒置显微镜下观察显示,与阳性对照细胞比较,MTSD处理48h的HSC-T6,胞体变小,部分细胞死亡碎裂.CCK-8检测证实,MTSD对HSC-T6生长具有抑制作用,与对照比较,MTSD处理的HSC-T6的生长减慢,48h开始其差异具有统计意义(P＜0.01).Real time-PCR、免疫荧光细胞化学及Westem blotting检测显示,MTSD能在mRNA及蛋白水平明显下调HSC-T6的TGFβ1、Smad3的表达,上调其Smad7的表达,与对照相比,其差异均具统计学意义(P＜0.01). 结论：MTSD能有效抑制HSC-T6的生长,下调其TGFβ1、Smad3的表达,同时使其Smad7的表达上调.