山茶花中儿茶素成分对MMP-1的抑制作用

摘要

紫外线引起的皮肤损伤可能造成皮肤炎症、DNA损伤、色素异常,严重情况会导致皮肤癌.在光老化过程中,基质金属蛋白酶(MMPs)是锌依赖性内肽酶,会分解细胞外基质(ECM)和基底膜的胶原蛋白,紫外线照射会减少胶原数量而增加MMPs表达,破坏真皮完整结构,产生皱纹. 研究表明,中药山茶花的乙醇提取物儿茶素有抑制MMP-1活性的作用(IC5o=32.lppm).因此,利用人皮肤成纤维细胞系分析了八种儿茶素成分(IC50=19.1～500μg/mL)对UV诱导的MMP-1的影响.实验方法主要包括原代人皮肤成纤维细胞的培养、细胞的紫外照射和儿茶素处理.实验表明EGCG和GCG可以充分显示出抑制MMP-1的活性,抑制效率分别为88.2％和92.6％,IC50分别为19.1和20.5μg/mL.儿茶素对MMP-1抑制活性受两方面因素影响:儿茶素结构骨架中的亲水取代基和立体化学结构.从八种成分的结构分析也可得知,EGCG和GCG具有最大的抑制活性.rn 同时,实验采用2,2-二苯基-1-苦基苯肼(DPPH)自由基清除试验来检测儿茶素的抗氧化性能,并用酶标仪测得565nm光密度值,结果表明儿茶素具有抗氧化活性.儿茶素的SC50值在1.6-11.9μg/mL之间,其中EGCG和GCG具有显著的抗氧化活性,SC50值分别为1.8和1.6μg/mL.为了阐明MMP-1和EGCG之间的结合机制,在EGCG和MMP-1活性结合位点之间进行了分子对接模拟,其中模型通过Surflex-Dock v.2.7 SYBYL-X 2.1.1程序构建,并通过Windows7 Home PremiumK 64-bit OS平台运行.结果发现,EGCG能够与重组人MMP-1很好的结合,且具有很高的亲和性.rn 综上所述,山茶花提取物EGCG和GCG可以调控MMP1的表达,能够作为一种抗氧化防衰老的添加剂.