猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒二重RT—PCR检测方法的建立

摘要

通过序列分析猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因和猪流行性腹泻病毒(PEDV)M基因,利用DNAStar软件分别设计二对特异性引物,扩增片段分别为299bp和437bp,建立一种针对TGEV和PEDV感染的二重RT—PCR鉴别诊断方法.该方法能同时检测到TGEV和PEDV,而对CSFV、PCV2、PRRSV、PRV等无扩增,其检测TGEV、PEDV的极限为104拷贝/μL和105拷贝/μL;用该方法对临床收集的108份粪便及肠道样品进行检测,结果表明:建立的二重RT—PCR方法具有特异性强,强灵敏度高等特点,能用于临床诊断及流行病学调查.