采用重组纤突蛋白片段检测猪流行性腹泻病毒抗体

摘要

2010年以来,猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)变异株的蔓延已对全球养猪业造成重大影响.快速准确的抗体检测方法是疾病诊断与免疫评估的重要技术手段.将PEDV流行株GDS01的S1及部分S2基因分成7段,在大肠杆菌中进行表达,获得7个重组蛋白片段SP1～SP7.分别用纯化的7个蛋白片段以及PEDV全病毒粒子为检测抗原,建立了检测猪血清PEDV抗体的间接ELISA方法.以156份血清样品为检测对象,将ELISA检测数据与中和抗体进行比较,评价以不同抗原为基础的ELISA方法与中和试验的相关性.结果表明SP4-ELISA检测结果与中和试验结果显著相关,其相关系数r=0.6113.在此基础上,应用受试者曲线(receivlng operating characteristics,ROC)分析验证SP4作为包被抗原建立的ELISA方法的可靠性,其线下面积( area unaer curve,AUC)为0.8538,表明该方法具有较高的可靠性.序列分析结果表明,不同PEDV毒株SP4片段高度同源,提示SP4重组蛋白为基础的ELISA检测方法可应用于多种毒株PEDV抗体的群体检测.