体外培养的绵羊多核绒毛膜滋养层细胞的生长变化

摘要

本试验用实验室培养得到较高纯度的绵羊多核绒毛膜滋养层细胞作基础,从细胞的稳定性和适应性方面进行了滋养层细胞的生长研究,根据倒置显微镜下对细胞形态的观察和连续7天的CCK-8跟踪标记的数据作出对应的生长曲线.冻存前与复苏后滋养层细胞培养结果表明,细胞在培养的相同时间内,复苏后的滋养层细胞形态变化较小,细胞适应能力变化较小,细胞存活率为80％左右.在7天的跟踪检测时间内，复苏后的滋养层细胞与冻存前保持相似的生长速度，生长趋势也相对一致。端粒酶质粒转染前与转染后结果表明，滋养层细胞在转染前细胞生长良好，经过端粒酶质粒pC1-neo-hTERT转染24h后，细胞生长无明显变化，直至第4天以后，被转染的滋养层细胞生长变缓，细胞数目减少，但是细胞融合现象增多，可能的原因是端粒酶质粒对细胞的分裂增殖起到一定作用，进一步的作用机理后续进行研究。滋养层细胞在Percoll纯化前与纯化后结果表明，将培养同期的原代滋养层细胞相比较，纯化前细胞形态较杂，细胞之间界限不很明显;纯化后的滋养层细胞形态统一，都为不规则的多角或多边形，生长呈铺展状，为典型的上皮样细胞。细胞核与细胞质分明，细胞界限清晰，双核及多核细胞较多，细胞融合现象明显。由此表明，运用纯化好的绵羊多核绒毛膜滋养层细胞从冻存、转染、纯化三方面对细胞的生命力、稳定性和适应性进行比较分析，发现纯化后的细胞都可以满足试验需求，在试验过程中其性状稳定，生长趋势良好，表明本实验室培养得到的绵羊多核滋养层细胞可以满足后续内源性病毒相关研究的需求。