双梯度离子交换色谱复性蛋白质

摘要

发展了一种双梯度离子交换色谱复性蛋白质技术,以变性的天然溶菌酶为模型蛋白,在阳离子交换色谱的洗脱过程中,经历了脲浓度由高到底和pH值由低到高逐步的变化,避免了蛋白质复性环境条件的骤然变化,提高了蛋白质的复性效率.与传统的稀释复性方法进行比较表明:双梯度离子交换色谱复性溶菌酶可以提高活性回收率2.5倍,复性后蛋白质浓度可达0.8g/L,相对于稀释复性的最适浓度0.03g/L,提高了二十多倍,可以减少溶液的处理量.因此,双梯度离子交换层析色谱复性蛋白质是值得推荐的快速复性高浓度蛋白质的方法.