中国猕猴五热日巴尔通体感染状况及遗传特征分析

摘要

目的：五热日巴尔通体(Bartonella quintana)由体虱在人群中传播,可引起战壕热、心内膜炎和杆菌性血管瘤等疾病.以往认为人类是唯一宿主,近年,国内外先后在食蟹猕猴和普通猕猴中发现这种巴尔通体.为进一步证实猕猴可作为五热日巴尔通体的自然宿主,本研究调查了来自国内4个地区、550只猕猴五热日巴尔通体的感染状况,并对菌株遗传特征进行了分析.rn 方法：采集北京、四川、广东和云南实验用猕猴全血和血清样品各550份,用于巴尔通体菌株分离和血清IgG检测.应用4个管家基因扩增及测序方法进行菌株鉴定、系统发育分析及核苷酸多态性分析;应用随机引物扩增方法分析不同宿主来源菌株RAPD指纹图谱差异;应用间接免疫荧光法(IFA)检测血清中抗五热日巴尔通体IgG水平.比较不同地区、猴种及性别间五日热巴尔通体感染水平差异.rn 结果：接种培养550只猴血液样品,普通猕猴和食蟹猕猴分别为300只和250只,雌、雄分别为303只和297只,除四川外,其他地区猴血样培养均为阴性.250只四川猕猴中有8只分离培养到疑似菌株,感染率为3.2％,这8只宿主猴5只为雌性,3只为雄性.与五热日标准菌株比对的相似性为99％-100％,单基因及MLSA(gltA-ftsZ-groEL-rpoB)序列构建系统树均显示与五日热巴尔通体聚在同一分支(图1),鉴定菌株为五日热巴尔通体.普通猕猴血清阳性率为19.0％,感染水平明显高于食蟹猕猴(5.6％)(表1),不同地区、不同性别的猕猴感染水平无差异(p＞0.05).应用3个随机引物扩增出来的RAPD指纹图谱显示四川猕猴菌株带型完全相同,有8条可辨别扩增带,与五热日巴尔通体人源菌株str.Fuller的带型基本一致,但在400bp和500bp处各缺失一条带;五热日巴尔通体与汉赛巴尔通体带型完全不同(图2).不同宿主来源菌株基因多态性分析显示五热日巴尔通体基因多样性特征明显,猴源菌株之间差异较小,与人源菌株差异较大.rn 结论：中国猕猴五热日巴尔通体感染水平较高,普通猕猴自然感染率及抗体水平明显高于食蟹猕猴,猴源菌株基因型与人源菌株有差异,进一步证实猕猴为五热日巴尔通体的自然宿主.