第7代人软骨细胞构建组织工程软骨的初步实验研究

摘要

目的:本文研究转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)作用后的体外培养第7代人软骨细胞形成组织工程软骨的能力.方法:分离人胎儿关节软骨细胞进行体外连续7代传代培养,实验组培养液为含15％胎牛血清(fetal calf serum,FCS)RPMI1640培养液,加入0.1ng/ml浓度的TGF-β1,隔日半量换液.并设立不加TGF-β1者为对照组.分别以实验组和对照组的第7代软骨细胞为种子细胞,种植于天然胶原膜支架.细胞-支架复合物体外培养24小时后,植入裸鼠体内,9周后取出标本,采用大体观察、苏木素-伊红染色和阿尔辛蓝-丽春红染色方法,观察实验组和对照组形成软骨的体积、弹性、细胞的生长分布和基质形成情况.结论:经TGF-β1作用的第7代人软骨细胞可作为组织工程软骨构建的种子细胞.用生长因子来维持体外培养并传代数代的软骨细胞的成软骨能力,可能是解决软骨组织工程种子细胞问题的策略之一.