壳聚糖/明胶复合不同软骨细胞体外构建组织工程软骨的研究

摘要

目的:探讨RNA干扰(RNAi) aggrecanases后的软骨细胞作为种子细胞的可行性,为组织工程软骨提供一种新的种子细胞.rn 方法:采用正常的软骨细胞以及aggrecanase-1,2受抑制软骨细胞分别作为种子细胞,将之复合到壳聚糖/明胶材料上进行体外培养,通过常规HE、甲苯胺蓝、番红O、Masson三色染色、免疫组织化学染色、扫描电镜观察以及RT-PCR等方法检测在培养的过程中蛋白多糖以及aggrecanase-1,2含量的变化情况.rn 结果:在培养2周时，壳聚糖/明胶-软骨细胞以及壳聚糖/明胶-干扰后的软骨细胞常规染色未见明显差别。随着培养时间的延长，常规染色、免疫组化以及RT-PCR均显示正常组和干扰组蛋白多糖和Ⅱ型胶原染色差别明显，干扰组蛋白多糖和Ⅱ型胶原含量明显高于正常组。RT-PCR结果显示干扰组aggrecanase-1,2基因表达明显低于正常组，蛋白多糖含量明显高于正常组，其差别具有统计学意义。rn 结论:RNAi后的软骨细胞可以作为种子细胞，其在材料上分泌蛋白多糖及胶原含量明显高于正常软骨细胞，可作为一种较为理想的种子细胞。