2D PAGE-MS方法分析肝移植后RBP4表达变化

摘要

视黄醇结合蛋白(Retinol-binding protein,RBP)是体内视黄醇从肝脏转运到靶组织的特异转载蛋白，肝功能受损RBP表达会明显下调，血清中RBP的表达水平能准确、灵敏地反映肝功能变化，可以帮助评价肝脏功能损害程度。RBP4作为一种新的循环性脂肪因子，已成为反映肾脏、肝脏及营养性疾病发展及转归的敏感指标，大量资料表明RBP4可能与癌症关系密切。因此肝移植后分析RBP4表达的变化对评价移植后肝功能的正常与否具有一定的诊断意义，本研究采用双向电泳(2D PAGE)—质谱技术(MS)证实肝移植后RBP4表达的变化。利用图像分析软件获得在移植后不同时间段逐渐呈上调趋势的差异蛋白质斑点A，胶内酶解提取该蛋白质肽段，进行质谱鉴定，测得的肽段序列进行MASCOT软件的MS/MS离子方式检索NCBInr蛋白质数据库，搜索结果为retinol-bindingprotein，蛋白质分值在218(单个离子分值>32分有意义)，匹配达到分值的肽段9个，蛋白序列匹配率37%，认为鉴定结果可靠。在该研究中移植前RBP4表达水平较正常低，与文献报道一致，在移植后表达逐步上调，实验结果可能对评价移植后肝功能的恢复有一定帮助。