NLRP3炎症小体在热应激损伤中的作用研究

摘要

目的：探讨NLRP3炎症小体在热应激损伤中的作用.rn 方法：利用野生型及NLRP3炎症小体相关的三种基因敲除小鼠,即NLRP3-/-小鼠、Caspase-1-/-小鼠和ASC-/-小鼠(均为C57BL/6小鼠),分别建立热应激损伤的细胞模型和动物模型.(一)细胞实验.培养野生型C57BL/6小鼠、NLRP3-/-小鼠、Caspase-1-/-小鼠和ASC-/-小鼠的腹腔巨噬细胞,热应激条件：40℃,4h,实验组别包括：空白对照组、热应激组、LPS组、LPS+热应激组.收集各组细胞培养液上清,ELISA法测定IL-1β的含量.（二）动物实验。实验组别包括空白对照组（C57BL/6野生型）、热应激组（C57BL/6野生型）、LPS组（C57BL/6野生型）、LPS+热应激组（C57BL/6野生型）、LPS+热应激组(NIRP3-/-)、LPS+热应激组(Caspase-1-/-)和LPS+热应激组(ASC-/-)。热应激组小鼠放入40℃高温模拟仓中给予热应激，LPS组小鼠腹腔注射LPS，LPS+热应激组小鼠腹腔注射LPS 4h后放入高温模拟仓中给予热应激。rn 结果：（一）细胞实验。各组细胞培养液上清IL-1β ELISA结果显示，野生型C57BL/6小鼠LPS+热应激组细胞培养液上清IL-1β浓度较其它三组基因敲除小鼠细胞培养液分泌水平显著升高(P<0.05)。（二）动物实验。动物血清IL-1β ELISA结果显示，经LPS+热应激处理后，野生型小鼠与其它三组基因敲除小鼠相比，血清IL-1β含量显著升高(P<0.05)。生存分析结果显示，在给予LPS+热应激处理后，NLRP3-/-小鼠、Caspase-1-/-小鼠和ASC-/-小鼠的生存时间较野生型小鼠显著延长(P<0.05)。rn 结论：细胞实验及动物实验结果显示，NLRP3炎症小体激活参与热应激损伤，抑制NLRP3炎症小体激活可减轻热应激的损伤作用。