抗奶牛γ-干扰素特异性单克隆抗体的研制及其特性

摘要

本文利用IPTG诱导大肠杆菌表达牛-γ干扰素融合蛋白(GST-BovIFN-γ),经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后,切取融合蛋白条带作为抗原免疫BALB/c小鼠.利用杂交瘤技术研制抗牛-γ干扰素(BovIFN-γ)的特异性单克隆抗体(mAb).采用间接免疫吸附试验(ELISA)方法筛选、Western-blotting、间接免疫荧光(IFA)方法进行鉴定,筛选出2株分泌特异性抗BovIFN-γ的杂交瘤细胞株,分别命名为BovIFN-γ-4A3和BovIFN-γ-4G5.该单抗可以与重组GST-BovIFN-γ和真核细胞表达的rBovIFN-γ反应,但不能与GST和鸡IFN-γ反应,说明单抗具有很好的特异性.进一步研究表明单抗能中和BovIFN-γ对水泡性口炎病毒(VSV)对牛肾细胞的致病变作用.这些单抗可用于奶牛结核病的监测和防治.